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11-30
STR細胞鑒定意義導讀:新買到的細胞,實驗室傳了幾代的細胞,又或者儲存于超低溫冰箱幾年不用的細胞,被污染了么?鑒定正確么?用它做研究會影響實驗結果么?沒有經過相應的細胞鑒定,使用了被污染的細胞,經過大量的實驗,寫出一篇論文,但是結論被推翻,論文被召回,大量的時間、物力和人力被浪費,一切都要從頭再來。背景介紹應用于生物醫學研究領域的哺乳動物細胞被錯誤鑒定和交叉污染的問題,一直是一個普遍存在的突出問題。據統計,國外實驗室有20%左右的細胞株被錯誤鑒定和交叉污染,NIH和ATCC近...
11-28
【技術文章】細胞養不好?這些注意事項請收好(三)1、購買的細胞死亡或存活率不佳可能原因?細胞冷凍管解凍后,為何會有細胞數目太少的情形?研究人員在細胞培養時出現存活率不佳,常見原因可歸納為:培養基使用錯誤或培養基品質不佳;血清使用錯誤或血清的品質不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸浮細胞誤認為死細胞;培養溫度使用錯誤;細胞置于–80℃太久。研究人員在冷凍細胞培養時出現細胞數目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞...
11-24
一個好的ATCC細胞株有多方面要求:1.產量高,高的產量直接降低固定投資和單次生產成本。2.產品質量符合要求。產品質量影響藥效和安全性。3.穩定性。產量和質量在生產傳代過程中不應有大的改變。一般認為在60-90PDL產量變化不超過30%是可以接受的。4.與生產過程的相容性。細胞株需要適合大規模生產放大。5.合規。ATCC細胞株的構建過程應避免接觸或使用動物來源成分或其它可能影響安全性的成分,保證單克隆性(clonality)以及整個過程的實驗記錄完整。ATCC細胞株無菌操作注...
11-15
貼壁細胞與懸浮細胞的都有哪些不同你都知道么一、貼壁生長的細胞核懸浮生長的細胞都有很多種。活體體內的細胞當離體置于體外培養時大多數均以貼壁方式生長,主要包括正常細胞和腫瘤細胞,比如成纖維細胞,骨骼組織(骨及軟骨),心肌與平滑肌、肝、肺、腎、乳腺皮膚神經膠質細胞,內分泌細胞,黑色素細胞及各種腫瘤細胞等。少數細胞在體外培養是懸浮生長,包括一些取自血、脾或骨髓的培養細胞,尤其是血液白細胞以及癌腫細胞。二、貼壁細胞與懸浮細胞在培養條件上的區別貼壁細胞要加血清,不貼壁的可以不加血清。三、...
10-27
病毒載體構建穩定細胞株有什么優勢?化學試劑介導的轉染方法和電轉,整合率低,同時整合位點不穩定,易發生再次丟失的情況,而且整合位點一般都在轉錄活躍區之外,所以并不是理想的穩定整合工具。另外,整合后的拷貝數是由核內的外源DNA局部濃度,而不是轉染時的DNA的量決定,而化學方法在輸入質粒載體入核的效率比電轉和病毒載體相比要低得多,導致其轉染相同細胞所用質粒載體用量要大大高于其它方法,造成入核質粒載體量難以控制,這也解釋了為什么化學轉染方法和其它兩種方比,更傾向于得到串聯多拷貝。以上...
10-19
ATCC細胞復蘇和培養*手冊細胞是我們很多基礎研究的基礎,那么細胞能否被成功復蘇就尤為重要了。美國菌種保藏中心,又稱美國模式菌種收集中心(ATCC),是位于馬里蘭洲洛克菲勒的一家私營的,非贏利性組織。目前它可以提供各種動植物細胞、標準品、菌株達兩萬多種。以下是來自ATCC的*說明,小凳子搬起來。01收到細胞的注意事項凍存的ATCC細胞株和雜交瘤細胞株在運送過程中使用干冰保持低溫。收到凍存細胞后,可以立即解凍復蘇,去除二甲基亞砜(DMSO)后進行細胞培養。如果不立即復蘇培養細胞...
9-28
白血病細胞株來告訴你白血病的病因一、輻射損傷電離輻射致白血病作用已在動物實驗中得到證實,而對人類的致白血病作用也從以下的事實得到提示:早期不加防護的放射線工作者,其白血病發病率比一般醫生高8-9倍;強直性脊柱炎的患者采用放射性治療者,白血病發病率比一般人高10倍,日本的廣島和長畸原子彈爆炸后,遭受輻射地區與末遭輻射地區的居民之間的白血病發病率相差30倍。二、化學因素已知很多化學物質有致白血病作用,如工業中廣泛應用的苯。藥物中的抗癌劑(尤以烷化劑)、乙雙嗎啉、氯霉素、保泰松、安...
9-26
我國在腫瘤光動力治療方面有重大進展耐藥是導致腫瘤患者化療失敗的主要原因,是攻克癌癥的一項重大挑戰。光動力治療(photodynamictherapy,PDT)可以利用光激發卟啉等光敏劑產生活性氧殺死腫瘤細胞,創傷小、毒性小、恢復快、可保護容貌,并且可利用光動力熒光診斷檢測早期癌或癌前病變,具有無創、快速、客觀等特點。但是,單一的光動力治療后,腫瘤容易復發。在國家重點研發計劃納米科技重點專項項目“基于納米分子影像探針的癌癥微創介入診療導航技術”的支持下,北京大學工學院戴志飛教授...
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