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5-11
細胞的復蘇及凍存方法一.細胞復蘇與培養將液氮或-80℃保存的腫瘤細胞于37℃水浴,快速溶化,用8.0ml培養基混勻已融化的腫瘤細胞懸液,于1500轉/分,離心3分鐘。棄上清,再吸取8.0ml培養基質混勻細胞沉淀,再1500轉/分,離心3分鐘,棄上清,細胞沉淀用1.0ml培養基混勻,備用。另取一個75cm2方瓶,加入14.0ml培養基質,將上述制備的含腫瘤細胞懸液(1.0ml)加入此方瓶中,于37℃,5%CO2孵育箱中培養。若此腫瘤細胞懸浮生長,大約3-4天細胞基質會變黃,5....
4-15
美國國家綜合癌癥網絡(NCCN)老年腫瘤指南中老年患者是指65歲以上的腫瘤患者。根據美國監測、流行病學與zui終結果(SEER)數據庫結果顯示:在美國乳腺癌發病人群中,65歲以上老年患者占到近50%,70歲以上占47%。我國乳腺癌發病年齡具有年輕化特點,老年患者所占比例達不到一半,但由于我國人口基數大,老年乳腺癌患者仍是一個很大群體,不能忽視。現將老年乳腺癌患者的特點及近年各種治療的研究進展作一綜述。1老年乳腺癌患者的特點1.1老年乳腺癌患者的生物學特性臨床發現雖然老年乳腺癌...
1-7
ATCC菌種保藏的重要意義就在于盡可能保持其原有性狀和活力的穩定,確保菌種不死亡、不變異、不被污染,以達到便于研究、交換和使用等諸方面的需要。ATCC菌種保藏的方法有哪些呢?傳代保存法有些微生物當遇到冷凍或干燥等處理時,會很快死亡,因此在這種情況下,只能求助于傳代培養保存法。傳代培養就是要定期地進行菌種轉接、培養后再保存,它是zui基本的微生物保存法,例如酸奶等常用生產ATCC菌種的保存。傳代保存時,培養基的濃度不宜過高,營養成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的...
10-27
ATCC細胞株在培養瓶長成致密單層后,已基本上飽和,為使細胞能繼續生長,同時也將細胞數量擴大,就必須進行傳代(再培養)。傳代培養也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養細胞進行各種實驗的必經過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以,而貼壁細胞需經消化后才能分瓶。ATCC細胞株一般使用蛋白水解酶(比如胰蛋白酶)消化貼壁細胞成單個細胞,也可加入乙二胺四乙酸(EDTA)提高消化能力,EDTA是一種二價離子的螯合劑,能抑制細胞膜上的Ca2+和Mg2+。常用的細胞消化液一般含有0.25%...
10-21
ATCC細胞株污染是實驗室細胞培養中常見的污染,即使在細胞培養液中加入了抗菌素,也可能因為操作不慎而引起污染。zui常見的有革蘭氏陽性菌,如枯草桿菌以及大腸桿菌、假單胞菌等革蘭氏陰性菌,其中又以白色葡萄球菌較常見。培養細胞受細菌污染后,會出現培養液變混濁,pH改變。污染后細胞發生病理改變,胞內顆粒增多、增粗,zui后變圓脫落死亡。真菌污染是ATCC細胞株培養過程中zui常見的一種,zui常見的真菌有煙曲霉、黑曲菌、孔子霉、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌。培養細胞受真菌污染后,可見...
9-26
黑色素瘤細胞株在培養瓶長成致密單層后,已基本上飽和,為使細胞株能繼續生長,同時也將細胞株數量擴大,就必須進行傳代(再培養)。傳代培養也是一種將細胞株種保存下去的方法。同時也是利用培養黑色素瘤細胞株進行各種實驗的必經過程。懸浮型黑色素瘤細胞株直接分瓶就可以,而貼壁細胞株需經消化后才能分瓶。一般使用蛋白水解酶(比如胰蛋白酶)消化貼壁細胞株成單個細胞株,也可加入乙二胺四乙酸(EDTA)提高消化能力,EDTA是一種二價離子的螯合劑,能抑制黑色素瘤細胞株膜上的Ca2+和Mg2+。常用的...
7-26
黑色素瘤細胞株是從一個經過生物學鑒定的細胞系或原代培養物用單細胞分離培養或通過篩選的方法,克隆具有特殊性質或標志的單細胞獲得的細胞群,稱細胞株。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。描述一個黑色素瘤細胞株時,必須說明它的特殊性質或標志。與細胞系類似,如果不能繼續傳代或傳代代數有限,可稱為“有限細胞株(finitecellstrain)”。如果可以連續傳代,則可稱為“連續細胞株(continouscellstrain)”。再由原細胞株進一步分離培養出與原株性狀不同的...
5-29
LWnt-3A小鼠皮下結締組織細胞信息由于這種條件培養基還包含Wnt-3A蛋白外的其他因子,對于涉及Wnt-3A條件培養基的實驗有必要用其來源細胞株(ATCCCRL-2648)作對照。L-M(TK-)cells(ATCCCCL-1.3)用Wnt-3A表達載體轉染并在含G418的培養基中篩選穩轉株。Wnt-3A基因編碼一個有變異的信號功效分泌性糖蛋白。Wnt基因控制胚胎發過程中的許多模式形成和生長事件。這些細胞分泌有生物活性的Wnt-3A蛋白。它們是目前生產Wnt-3A條件培養...
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