細胞株購買以及真假鑒別雜談
細胞株是廣大的科研工作者和用戶常用的實驗室試劑耗材,可是市場上通常會有假冒偽劣細胞株,嚴重擾亂市場秩序。如何鑒別細胞株的真偽?
近來,許多客戶向我們反映一些唯利是圖的公司和小作坊,用假冒偽劣的細胞株坑害廣大的科研工作者,嚴重擾亂了科研工作,嚴重擾亂了市場秩序,我們有義務,有責任揭露這些作偽造假者制作假冒偽劣細胞株的手法,同時提供如何鑒別這些假冒偽劣細胞株的方法,供廣大的科研工作者和用戶參考,讓那些掛羊頭賣狗肉,冒牌進口試劑,以及全無誠信,作假造偽者,如過街之鼠,人人喊打。
某些奸商在國外注冊公司,國內生產,隱瞞生產產地,明明是國產試劑卻宣稱國外進口虛報高價,欺騙廣大用戶;或是仿冒進口細胞株,使得進口分裝ELISA質量參差不齊,魚龍混雜,很多都是經小作坊粗劣加工而成。有些為了夸大其生產ELISA涵蓋的指標的范圍,甚至用一種指標來冒充其它指標,造成各種種屬、各種指標都可以做的假象。比如用TGFβ這樣的指標代替大多數試劑盒的其他指標作為檢測抗體,同樣可以獲得良好的標準曲線。因為TGFβ在大多數哺乳類動物中(人、大鼠、小鼠、豬、牛……)都有廣泛表達,種屬間抗原的氨基酸序列同源性達100%,TGFβ隨著其他因子的影響,其表達水平也會發生相應的變化,一般客戶很難察覺,因此這樣的惡性造假行為使得消費者被動造假,后果極其嚴重,因此善意提醒客戶警惕此類作假試劑盒!
鑒別細胞株真偽的方法:
一.利用干擾實驗即可辨別細胞株是否檢測目的抗原,方法如下:
(1) 將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody: antigen≈1:2的混合孵育液(2) 37℃孵育15分鐘后,代替原試劑盒中的檢測抗體(3) 后續操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復合物和底物(4) 實驗完畢后,檢測其標準曲線,如果標準曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑盒檢測抗體針對的是非目的抗原,該試劑盒為偽劣假造細胞株。 (5) 如果標準曲線無線性,則說明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾,影響了其實際試劑盒抗體的檢測作用,則該試劑盒檢測抗體針對的是目的抗原。
二. 如果購買了兩盒同一公司的細胞株A和B,利用交叉實驗即可辨別細胞株是否造假,方法如下:
(1) 取出購買的試劑盒A的包被板兩條。
(2) 一條包被板加試劑盒A的標準品做標準曲線。
(3) 另一條包被板加試劑盒B的標準品做標準曲線。
(4) 后續操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復合物和底物。
(5) 實驗完畢后,檢測兩條標準曲線,如果兩條標準曲線一致則說明兩個細胞株檢測的同一個指標而非A和B,即該試劑盒為偽劣假造細胞株。
(6) 如果兩條標準曲線不一致則說明兩個細胞株檢測的不同指標,試劑盒A只能檢測A,不能檢測B,即該試劑盒為正常的細胞株。
如何鑒別假冒偽劣細胞株,另外,大家還可以將“廠家名”、“ELISA”和“假貨”關鍵詞在google上搜索,各類論壇的用戶會將該細胞株的質量和效果,是否偽劣一一有所討論;或者直接打給生產廠商,詢問他們試劑盒抗原和抗體的來源,索要試劑盒說明書,然后利用網絡確認這些信息,正規的ELISA生產商,這些信息都是非常齊全,如果信息不全,則該ELISA的制造水平和質量都會很差。