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你知道你培養(yǎng)的細(xì)胞還是不是原來(lái)的細(xì)胞?

更新時(shí)間:2019-12-25      點(diǎn)擊次數(shù):1542
   你知道你培養(yǎng)的細(xì)胞還是不是原來(lái)的細(xì)胞?
  要說(shuō)一個(gè)實(shí)驗(yàn)汪怕什么,細(xì)胞養(yǎng)死了是*
  但是,還有一種情況更絕望,那就是——細(xì)胞還好好的,但是這個(gè)細(xì)胞它已經(jīng)不是它!
  所以,你新買(mǎi)到的細(xì)胞、實(shí)驗(yàn)室傳了幾代的細(xì)胞、又或者儲(chǔ)存于超低溫冰箱幾年不用的細(xì)胞,它真的還是原來(lái)的那個(gè)細(xì)胞嗎?
  其實(shí)細(xì)胞系認(rèn)證的問(wèn)題已經(jīng)存在了幾十年,2017年,有機(jī)構(gòu)研究抽查了中國(guó)28個(gè)研究機(jī)構(gòu)中保存的278個(gè)細(xì)胞系,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行鑒定。
  調(diào)查結(jié)果顯示,有128個(gè)細(xì)胞系是錯(cuò)誤鑒定的,錯(cuò)誤率高達(dá)46%。
  因使用了交叉污染或錯(cuò)誤辨識(shí)的細(xì)胞而導(dǎo)致研究結(jié)論錯(cuò)誤、結(jié)果不可重復(fù)、臨床細(xì)胞**災(zāi)難性后果……這浪費(fèi)大量時(shí)間、精力和金錢(qián)。
  細(xì)胞系被錯(cuò)誤識(shí)別,往小了說(shuō)會(huì)浪費(fèi)時(shí)間和金錢(qián),導(dǎo)致結(jié)果不可重復(fù)性,文獻(xiàn)被退回;
  往大了講還可能對(duì)人類健康產(chǎn)生潛在的威脅,、疫苗和其它生物都是以實(shí)驗(yàn)室的研究發(fā)現(xiàn)為基礎(chǔ)而產(chǎn)生的,往往都是跟細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)。
  細(xì)胞是一種很特殊的商品,由于其具有可復(fù)制性,因此很容易被自行復(fù)制后進(jìn)行出售傳播,而這些自行傳代復(fù)制的細(xì)胞幾乎*,所以很容易引起大家購(gòu)買(mǎi)。
  但是這些細(xì)胞傳代的次數(shù)、培養(yǎng)的條件以及是否有污染等都無(wú)法得到保障,等你實(shí)驗(yàn)焦頭爛額毫無(wú)進(jìn)展卻突然發(fā)現(xiàn)是細(xì)胞被污染了,那滋味真的是不好受的!
  有沒(méi)有想過(guò)細(xì)胞STR鑒定?!
  細(xì)胞STR鑒定是什么?——給你的細(xì)胞一個(gè)“明明白白的”身份!
  STR,全稱Shorttandemrepeat,中文名“短串聯(lián)重復(fù)序列”,是一類廣泛存在于真核生物基因組中的DNA串聯(lián)重復(fù)序列,其核心序列2~7bp,重復(fù)次數(shù)通常為10~30次。由于核心序列重復(fù)次數(shù)的個(gè)體間差異,多數(shù)STR基因具有多態(tài)性。
  不同個(gè)體來(lái)源的細(xì)胞在不同STR位點(diǎn)具有特異性的重復(fù)次數(shù),因而使得不同細(xì)胞具有其特征性的圖譜,根據(jù)圖譜的數(shù)據(jù)可以判定細(xì)胞是否為單一細(xì)胞。
  近年來(lái)由于其檢測(cè)手段和技術(shù)方法的改進(jìn)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于遺傳制圖、基因定位、法醫(yī)學(xué)鑒定、人類學(xué)以及遺傳病的診斷等許多領(lǐng)域的研究,是目前應(yīng)用比較廣泛的遺傳標(biāo)記。
  細(xì)胞STR鑒定的特點(diǎn)
  STR圖譜鑒別通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化的操作,采用自動(dòng)化的DNA分析儀對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行**的分析,并以簡(jiǎn)單的數(shù)字描述STR序列重復(fù)次數(shù),不僅增加了結(jié)果的客觀性,而且所需細(xì)胞數(shù)量少(低至1×103個(gè)細(xì)胞,
  而細(xì)胞檢定中常規(guī)采用的同工酶法通常需要5×106個(gè)細(xì)胞),結(jié)果穩(wěn)定,特異性強(qiáng)。總的來(lái)說(shuō),其分型快速、經(jīng)濟(jì)、易于自動(dòng)化,可重復(fù)性好,且數(shù)據(jù)格式適合建立一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)參考數(shù)據(jù)庫(kù)的特點(diǎn),使得STR的應(yīng)用價(jià)值*大。
  細(xì)胞STR鑒定的案例
  已被描述的經(jīng)典案例是Hela細(xì)胞污染(關(guān)于Hela細(xì)胞污染有好幾個(gè)案例),令人驚奇的是,許多被Hela細(xì)胞污染的細(xì)胞系居然在一些備受尊敬的雜志上仍被使用,而這一使用距離它們*先發(fā)現(xiàn)為Hela細(xì)胞的時(shí)間長(zhǎng)達(dá)40年之久。
  T24是另外一種生長(zhǎng)快速的細(xì)胞系,它常常污染許多經(jīng)推測(cè)來(lái)源于不同膀胱癌的細(xì)胞系。EVC304*先被認(rèn)為是自發(fā)轉(zhuǎn)化的人類正常內(nèi)皮細(xì)胞系,但后來(lái)卻發(fā)現(xiàn)它是T24膀胱癌細(xì)胞系。令人感到意外的是,EVC304不是內(nèi)皮細(xì)胞的這一論述對(duì)它作為內(nèi)皮細(xì)胞模型的公開(kāi)發(fā)表幾乎沒(méi)多大影響。
  細(xì)胞STR鑒別刻不容緩
  有許多緣由可以引起細(xì)胞培養(yǎng)物錯(cuò)誤鑒定,每一個(gè)實(shí)驗(yàn)室都存在風(fēng)險(xiǎn)。
  造成這種問(wèn)題出現(xiàn)的原因有:實(shí)驗(yàn)員的工作負(fù)荷,缺乏注意,在細(xì)胞操作過(guò)程中的分心,試劑的共用,耗材共用,在沒(méi)有充分分離每一細(xì)胞類型情況下同時(shí)對(duì)多個(gè)培養(yǎng)物進(jìn)行操作等。
  當(dāng)交叉污染發(fā)生時(shí),一種細(xì)胞類型迅速生長(zhǎng)而超過(guò)另一種,在4-5次細(xì)胞傳代后,一個(gè)純的污染細(xì)胞培養(yǎng)物將會(huì)形成。
  異種移植也會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞系交叉污染和錯(cuò)誤鑒定,來(lái)自異種移植的復(fù)蘇細(xì)胞會(huì)被宿主動(dòng)物細(xì)胞所替代。因此,由于這些缺乏重視及未采取質(zhì)控措施導(dǎo)致的細(xì)胞錯(cuò)誤鑒定現(xiàn)象開(kāi)始普遍。
  但簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)的質(zhì)控措施即可以阻止或至少會(huì)減少細(xì)胞錯(cuò)誤鑒定的發(fā)生,這也被認(rèn)為是生物制藥領(lǐng)域出現(xiàn)相對(duì)較低細(xì)胞錯(cuò)誤鑒定報(bào)道的有效手段。
  細(xì)胞系遭污染,也許很容易發(fā)生,但發(fā)生了對(duì)科學(xué)研究影響有多大?Nature社論文章稱,這要取決于實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的類型。
  比如說(shuō),細(xì)胞系被用作生化藥劑來(lái)源,混入其中的另外一種細(xì)胞則是無(wú)害的。但是,如果用這個(gè)細(xì)胞系來(lái)研究某一組織的特性則可能出現(xiàn)重大的失誤。因此,細(xì)胞鑒別格外重要。
  沒(méi)有一個(gè)單一的方法可提供所有的信息來(lái)鑒定一個(gè)細(xì)胞系。
  STR分型是這一時(shí)期的*佳代表。隨著新信息的可用,STR分型標(biāo)準(zhǔn)將會(huì)不斷地改進(jìn),不僅保證科研用細(xì)胞的正確性,還要作為生產(chǎn)用細(xì)胞的質(zhì)控方法,用于過(guò)程監(jiān)測(cè)。
  素爾生物——細(xì)胞系培養(yǎng)&STR鑒定服務(wù)雙重服務(wù)
  素爾生物細(xì)胞引進(jìn)于ATCC/中科院/協(xié)和醫(yī)院,已篩選出數(shù)百種狀態(tài)良好的細(xì)胞系,構(gòu)建了自家細(xì)胞庫(kù)。本著嚴(yán)謹(jǐn)負(fù)責(zé)的態(tài)度,對(duì)細(xì)胞庫(kù)中幾乎所有的人源細(xì)胞系、大鼠細(xì)胞系、小鼠細(xì)胞系進(jìn)行了STR鑒定,為您的科研工作提供安全保障。
  不再擔(dān)心細(xì)胞黑身份,明明白白做實(shí)驗(yàn)的方法,你get到了沒(méi)?
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